Хеликобактер пилори, ДНК i

ПЦР диагностика Helicobacter pylori.

ПЦР диагностика инфекций: Helicobacter pylori (кал)

Нарушение работы органов желудочно-кишечного тракта, что проявляется болью в животе, постоянным чувством тяжести, возникающим после еды, могут свидетельствовать о появлении в желудке или 12-перстной кишке бактерии Helicobacter pylori. Подтвердить ее присутствие в организме можно с помощью многих методов, наиболее достоверным из которых считается ПЦР (полимеразная цепная реакция) в кале. Анализ основан на обнаружении фрагментов ДНК в испражнениях.

Helicobacter pylori — бактерия, является представителем патогенной микрофлоры. В процессе своей жизнедеятельности она вырабатывает токсичные вещества, поражающие слизистую. Сначала это небольшое воспаление желудочной стенки, что изредка напоминает о себе болью в желудке, тошнотой, рвотой. С течением времени пораженные места преобразуются в язвы и эрозии, новообразования.

Как правило, заражение хелибактер происходит внутри семьи и тесного сообщества посредством слизи и слюны, то есть бытовым путем. Нарушение правил личной гигиены, пользование общей посудой и полотенцами значительно увеличивают риск «подхватить» бактерию.

Показания к проведению анализа

Правила подготовки к исследованию кала

Результаты исследования

Проведение ПЦР исследования может предоставить либо положительные, либо отрицательные результаты.

Положительный результат указывает на присутствие в организме бактерии. Однако указать в острой форме заболевание или нет, не может.

Отрицательный результат подтверждает отсутствие Helicobacter pylori в организме больного.

Нужно отметить, что даже после эрадикации хелибактер анализ еще долгое время будет положительным, поскольку будут отходить ДНК-фрагменты погибших микроорганизмов.

97-84-100. Хеликобактер пилори, ДНК H.pylori, кач.

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): A26.19.070.001 «Определение ДНК хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) в образцах фекалий методом ПЦР»

Срок выполнения (в лаборатории): 5 р.д. *

Описание

Исследование кала направлено на обнаружение генетического материала ДНК Helicobacter pylori (хеликобактера пилори) для первичной диагностики инфицирования хеликобактерией и для оценки эффективности противоэрадикационной терапии.
Бактерия Helicobacter pylori — один из самых распространенных бактериальных агентов в мире, который участвует в возникновении целого рядя заболеваний желудочно-кишечного тракта: хронический гастрит, язвенная болезнь желудка, язвенная болезнь 12-перстной кишки. Кроме того, с 1994 г. Helicobacter pylori относится к канцерогенам первого порядка.

Показания к назначению

  • Диагностика инфекции Helicobacter pylori.
  • Контроль эффективности антихеликобактерной терапии.

Подготовка к исследованию

  • Кал следует сдавать до начала приёма антибактериальных препаратов (если это невозможно, то не ранее чем через 12 часов после отмены препарата).
  • Перед исследованием необходимо исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.) и на окраску кала (железа, висмута, сернокислого бария), в течение 72 часов до сдачи кала.

Ингибирующее действие могут оказывать: гемоглобин, гепарин, билирубин и желчные кислоты, слизь, гормоны, ферменты, соли, ионы металлов продукты жизнедеятельности микрофлоры. Лекарственные препараты-антибактериальные, химиотерапевтические, слабительные и усиливающие моторику средства, препараты висмута, железа, сернокислого бария, ректальные свечи, в том числе и на глицериновой основе

Читайте также:  Диагностика и лечение заболеваний передающиеся половым путем

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

Иследование кала направлено на обнаружение генетического материала ДНК Helicobacter pylori (хеликобактера пилори) для первичной диагностики инфицирования хеликобактерией и для оценки эффективности противоэрадикационной терапии, направленной на элиминацию патогена из организма. Бактерия Helicobacter pylori — один из самых распространенных бактериальных агентов в мире, ассоциированность с которым вызывает целый ряд заболеваний желудка: хронический гастрит, язвенная болезнь желудка, язвенная болезнь 12-перстной кишки. Кроме того, с 1994 г. Helicobacter pylori относится к канцерогенам первого порядка.

Сбор биоматериала проводится до начала лечения анибактериальными препаратами.

Анализ кала на хеликобактер

  • Что представляет собой хеликобактерия?
  • Кому рекомендуется проверить анализ кала на хеликобактерию?
  • Способ бактериологического посева
  • Иммунологические способы исследования
  • Метод ПЦР
  • Как оценить результаты анализов?
  • Как подготовиться к сдаче анализа?
  • Дополнительные исследования
  • Видео по теме

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность — отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования — выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Что представляет собой хеликобактерия?

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

  • оксидаза,
  • уреаза,
  • каталаза.

К особенностям микроорганизма относятся:

  • сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
  • длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
  • возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Кому рекомендуется проверить анализ кала на хеликобактерию?

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

  • вздутие живота;
  • отрыжка;
  • изжога;
  • болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
  • запоры или поносы;
  • чувство тяжести в эпигастрии;
  • снижение аппетита;
  • резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

  • необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
  • признаки железодефицитной анемии;
  • неясная тромбоцитопения;
  • возможность заражения членов семьи;
  • контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
  • выяснение связи с генетической предрасположенностью.
Читайте также:  Атриовентрикулярные блокады – систематизация, диагностика, неотложная терапия

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Способ бактериологического посева

Выделение культуры возбудителя — микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

  • посев должен проходить без доступа кислорода;
  • можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
  • результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
  • анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

Иммунологические способы исследования

Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант — первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Метод ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

  • при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
  • желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
  • атрофическом поражении слизистой желудка;
  • полипах;
  • опухолях желудка;
  • выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
  • контроле за результатами терапии антибиотиками.

Преимуществами ПЦР кала можно считать:

  • высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
  • простоту проведения;
  • безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
  • возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
  • выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.
  • не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
  • нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
  • чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
  • сравнительно высокая стоимость;
  • необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
  • положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).
Читайте также:  Почему возникает гангрена 1

Как оценить результаты анализов?

Расшифровка результатов исследования — дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

  • отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
  • положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

  • выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
  • если количество микроорганизмов больше нуля — подтверждается хелибактериоз;
  • знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
  • R — указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
  • I — чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

  • 1 степень — наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах — роста нет;
  • 2 степень — вырастает до 10 колоний;
  • 3 степень — число выросших колоний достигает 100;
  • 4 степень — распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Как подготовиться к сдаче анализа?

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

  • прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
  • контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
  • некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
  • запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
  • собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
  • непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
  • доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Дополнительные исследования

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

Ссылка на основную публикацию
Фурацилин для полоскания горла отзывы
Как правильно полоскать горло О секретах эффективного полоскания и о случаях, когда таким способом лечить горло не имеет смысла, Дни.ру...
Французские бренды и сайты косметики список лучших
Французские фирмы косметики В отличие от американских drugstores , французские аптеки предназначены только для реализации лекарственных препаратов и средства для...
Фрау Клиник адрес, информация, Frau Klinik отзывы, Москва, м
Клиника пластической хирургии и косметологии Frau Klinik Клиника «Frau Klinik» была основана известными хирургами: профессором Блохиным С.Н. и доктором Вульфом...
Фурацилин инструкция по применению, аналоги, состав, показания
ФУРАЦИЛИН АВЕКСИМА (Furacilin) Действующее вещество: Содержание Состав Фармакологическое действие Фармакодинамика Фармакокинетика Показания препарата ФУРАЦИЛИН АВЕКСИМА Противопоказания Применение при беременности и...
Adblock detector